尊龙凯时为您带来SH-SY5Y细胞培养的必读指南。SH-SY5Y细胞系是重要的人神经母细胞瘤细胞模型,广泛应用于神经生物学研究,包括神经分化、神经退行性疾病建模及药物毒性测试等领域。
一、SH-SY5Y细胞培养注意事项
1. 培养基与条件
基础培养基:常用DMEM或RPMI-1640,并补充10-15%的胎牛血清(FBS)与1%双抗。
培养条件:保持在37℃、5% CO₂及湿度饱和的环境中。
换液频率:每2-3天更换培养液,以防细胞过度消耗营养。
2. 细胞传代
消化时间:采用0.25%胰酶(含EDTA)消化1-3分钟,注意避免过度消化,以防止细胞损伤。
传代比例:一般保持在1:3至1:6,根据细胞密度进行调整(当细胞融合度达到80-90%时进行传代)。
轻柔操作:SH-SY5Y细胞贴壁较松散,操作时需轻柔,以避免机械性损伤。
3. 细胞状态监测
形态观察:健康的SH-SY5Y细胞呈现梭形或三角形,且聚集生长。如出现细胞变圆、脱落或碎片增多的现象,需警惕细胞状态不佳或可能存在污染。
污染防控:请务必遵循严格的无菌操作规范,定期检测支原体污染。
4. 冻存与复苏
冻存液:推荐使用无血清细胞冻存液(货号:WXQA100)。
复苏:确保快速解冻,然后离心去除DMSO,进行高密度接种,以提高细胞存活率。
二、常见问题与解决方案
细胞贴壁性差:可以通过增加培养基中血清比例(例如提高至15% FBS),或使用多聚赖氨酸对培养皿进行包被来改善。
容易自发分化:要避免细胞过度融合(超过90%),并及时进行传代。
在尊龙凯时,我们已经引进了百余种细胞种子,主要来自HTCC、DSMZ、JCRB、中科院及国家干细胞资源库等权威机构。所有人源细胞系均提供STR鉴定报告,而鼠源细胞系也提供种属鉴定,确保准确性与可靠性。我们的细胞经过批量冻存及严格的代次管控,同时完成无菌和无支原体检测,为您的研究提供高质量的细胞支持。